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SILAC蛋白質組分析技術
實驗流程??
應用領域
技術優勢
細胞培養氨基酸穩定同位素標記（Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture, SILAC），是2002年丹麥Mann實驗室對AACT技術作進一步改進而獲得，并開始應用于定量蛋白質組學研究，為**、系統地定性和定量分析復雜哺乳動物細胞蛋白質組提供有效的解決方案。?
- 疾病標志物篩選
- 作用機制研究
- 藥物作用靶點研究
- 特殊功能蛋白質篩選
- 多個樣本混合后同時進行分離、酶切和鑒定，后續實驗對樣品的影響是一致的，減少了實驗操作和儀器設備引入的定量誤差；
- 體內標記技術，標記不受裂解液成分影響，效果穩定，標記效率高達99%；
- 可以對在DMEM、DMEM-F12、1640三種培養基中培養的多種細胞進行標記；
- 靈敏度高，樣本量要求少。
技術原理
?SILAC的基本原理是分別用天然同位素（輕型）或穩定同位素（重型）標記的必需氨基酸取代細胞培養基中相應氨基酸，細胞經>6個倍增周期后，穩定同位素標記的氨基酸**摻入到細胞新合成的蛋白質中取代了原有氨基酸。不同標記細胞的裂解蛋白按細胞數或蛋白量等比例混合，經分離、純化后進行質譜鑒定。
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